必須了解的
抗體檢測試劑盒基礎(chǔ)知識
抗體檢測試劑盒用純化的抗原包被微孔板,往包被抗體的微孔中同時加入酶標的抗體和待測抗體,被測抗體與酶標記抗體對特異性抗原進行競爭結(jié)合。經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。待測標本濃度越高,標記抗體和抗原的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測物質(zhì)含量呈負相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
今天小編要為各位帶來的是抗體檢測試劑盒相關(guān)事項說明說明:
1、只有全部使用抗體檢測試劑才能保證檢測效果,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守抗體檢測試劑的試驗說明才會得到較佳的檢測結(jié)果。
2、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
3、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
操作抗體檢測試劑盒需注意:
1、不同廠家生產(chǎn)的抗體檢測試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照抗體檢測試劑盒說明書嚴格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2、若不同批號抗體檢測試劑盒的不同組分(a液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、反應時間的誤差,做大量標本時,孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4、臨界值附近標本波動為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復檢。
5、加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響極大,建議校對加樣器。